Rôle des Phosphoinositides dans la division asymétrique - DUMAS - Dépôt Universitaire de Mémoires Après Soutenance Accéder directement au contenu
Mémoires Année : 2016

Role of phosphoinositides in the asymmetric division

Rôle des Phosphoinositides dans la division asymétrique

Résumé

Asymmetric cell division is a mechanism by which cell fate diversity is generated during the development. The epithelium of Drosophila thorax has been used as a model. This monolayer epithelium is composed of precursor cells that divide asymmetrically. At each division, the cell fate determinant Numb localizes at one pole of the cell and represses the Notch pathway in one of the daughter cells. in-vitro experiments show that Numb binds to PI(4,5)P2 phospholipids by electrostatic interactions, which is a mechanism that could contribute to its asymmetric repartition. The aim of this study is to test this hypothesis in-vivo. To modulate the PI(4,5)P2 level at the plasma membrane, we developed an optogenetic approach based on the fast and reversible dimerization of two plant proteins (CRY2 and CIBN) under excitation at 488nm. To decrease the PI(4,5)P2 concentration at the plasma membrane, the inositol 5-phosphatase OCRL fused to CRY2 is relocalized by its binding to CIBN anchored at the plasma membrane. This study permitted to precize the experimental conditions of the relocalization of OCRL in a space- and time-controlled manner. This work constitute an important step to next test the role of PI(4,5)P2 in the unequal Numb localization.
La division cellulaire asymétrique est un mécanisme par lequel la diversité de destins cellulaires est générée au cours du développement. L’épithélium du thorax de Drosophile a été utilisé comme modèle d’étude. Il s’agit d’un épithélium monocouche au sein duquel un précurseur subit une série de divisions asymétriques. À chaque division, le déterminant d’identité cellulaire Numb localise à un pôle de la cellule et ségrége dans une cellule fille pour réprimer la voie Notch. In-vitro Numb se lie aux phospholipides PI(4,5)P2 par des interactions électrostatiques, un mécanisme qui contribuerait à sa répartition asymétrique. L’étude a consisté à tester cette hypothèse in-vivo. Pour moduler le niveau de PI(4,5)P2 à la membrane plasmique nous avons développé une approche d’optogénétique basée sur la dimérisation rapide et réversible de deux protéines de plante (CRY2 et CIBN) suite à une excitation à 488 nm. Pour réduire la concentration de PI(4,5)P2 à la membrane plasmique, l’inositol 5-phosphatase OCRL couplée à CRY2 est relocalisée par liaison à CIBN ancrée à la membrane plasmique. Cette étude a permis de définir les conditions expérimentales de relocalisation d’OCRL de façon contrôlée dans le temps et l’espace, une étape clé pour tester le rôle de PI(4,5)P2 dans la localisation inégale de Numb.
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Dates et versions

dumas-01360921 , version 1 (06-09-2016)

Identifiants

  • HAL Id : dumas-01360921 , version 1

Citer

Pierre-Alexis Billa. Rôle des Phosphoinositides dans la division asymétrique . Sciences du Vivant [q-bio]. 2016. ⟨dumas-01360921⟩
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