Cytométrie en flux des microparticules : application à la thrombopénie induite par l'héparine

Résumé : Depuis quelques années, le rôle potentiel de biomarqueur des MP suscite un intérêt croissant mais leur petite taille, comprise entre 0.1µm et 1µm, rend difficile leur détection. La cytométrie de flux (CMF) offre une analyse multiparamétrique, rapide, de milliers d’évènements de façon spécifique et sensible, cependant une adaptation aux MP reste nécessaire afin de garantir une détection précise et standardisée. Les objectifs de ce travail ont été de montrer l’évolution et les spécificités de la CMF des MP et d'évaluer les performances d'un nouveau cytomètre fluo-sensible (le CytoFLEX, Beckman-Coulter) en condition physiopathologique sur des sujets sains et atteints de thrombopénie induite par l'héparine (TIH). Nous avons démontré une amélioration des performances du CytoFLEX associée à un gain de détection de MP chez des sujets sains en comparaison au Gallios. L’application à la cohorte clinique a mis en évidence une augmentation significative des concentrations de MP leucocytaires dans la TIH. Cependant nous avons observé que le gain en sensibilité de fluorescence s’accompagne de détection non spécifique de MP. En conclusion, notre étude montre une amélioration de détection des MP par CMF avec le CytoFLEX mais montre les difficultés liées à la détection de petites MP en raison de leur proximité avec le bruit de fond de fluorescence. Ceci montre la nécessité de développer des outils et stratégies permettant un dosage sensible, spécifique et reproductible assurant une meilleure définition de l'intérêt des MP comme biomarqueur clinique.
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Master Thesis
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Contributor : Pharmacie Amu <>
Submitted on : Wednesday, November 8, 2017 - 1:42:02 PM
Last modification on : Thursday, April 18, 2019 - 11:44:12 PM
Long-term archiving on : Friday, February 9, 2018 - 12:58:20 PM

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FRITZ Shirley. Mémoire de DES...
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Shirley Fritz. Cytométrie en flux des microparticules : application à la thrombopénie induite par l'héparine . Sciences pharmaceutiques. 2017. ⟨dumas-01630932⟩

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