Validation d’un plan de suivi métrologique du pH en culture embryonnaire - DUMAS - Dépôt Universitaire de Mémoires Après Soutenance Accéder directement au contenu
Mémoires Année : 2021

Validation of a metrological monitoring plan for pH in embryonic culture

Validation d’un plan de suivi métrologique du pH en culture embryonnaire

Résumé

In a laboratory of medically assisted reproduction, the quality of embryonic development is closely linked to the environmental conditions to which embryos are exposed, notably in incubators. The pH of culture media is one of the essential critical parameters to be mastered in embryonic culture. The main goal of this study is the validation of the pH measurement method of our embryonic culture media. The secondary objectives are the evaluation of different conditions that can fluctuate the pH in the laboratory (handling of the media, incubation time of the media, presence of covering oil, CO2 content of the incubators). We chose to use a blood gas analyzer (RapidPoint 500) to perform the pH measurements. The culture media evaluated was continuous single culture complete (CSCM-C®) from IrvineScientific and the incubators tested were the K-Systems G210TM incubators. In order to validate this new method of pH measurement, pH stress tests followed by an evaluation of the performance of the method were carried out, in accordance with the requirements of COFRAC (French Committee for Accreditation). The performance tests carried out in this study showed good results and thus allow the validation of the method. The correlation study between the pH of the culture media and CO2 rate of the incubators allowed the definition of a new CO2 target value for the incubators in the laboratory: the new optimal rate is 7% with corresponding EMTs of +/- 1%. This new method of pH measurement of our environment will fit perfectly with our metrological strategy currently in place in the laboratory. Regular pH controls, established according to a frequency defined by the head biologist, will make it possible adapt the CO2 content of incubators and then will take part in the optimization of embryonic culture conditions.
Au sein d’un laboratoire d’aide médicale à la procréation, la qualité du développement embryonnaire est étroitement liée aux conditions environnementales auxquelles les embryons sont exposés, notamment dans les incubateurs. Le pH des milieux de culture est un des paramètres critiques essentiel à maitriser en culture embryonnaire. L’objectif principal de ce travail est la validation de méthode de la mesure du pH de notre milieu de culture embryonnaire par un analyseur à gaz du sang. Les objectifs secondaires sont l’évaluation de différentes conditions pouvant faire varier la valeur de ce pH au laboratoire : manipulations du milieu, temps d’incubation du milieu, présence d’huile de recouvrement, teneur en CO2 des incubateurs. Nous avons choisi d’utiliser un analyseur à gaz du sang de biologie délocalisée (RapidPoint 500) pour effectuer les mesures de pH. Le milieu de culture évalué est le Continuous Single Culture Complete (CSCM-C®) de chez IrvineScientific et les incubateurs testés sont les incubateurs K-Systèmes G210TM. Afin de valider cette nouvelle méthode de mesure du pH, des tests de stress du pH suivis d’une évaluation des performances de la méthode ont été réalisés, conformément aux exigences du COFRAC. Les tests de performance réalisés dans ce travail montrent de bons résultats et permettent ainsi la validation de la méthode. L’étude de corrélation entre le pH du milieu de culture et le taux de CO2 des incubateurs a permis de définir une nouvelle valeur cible de CO2 pour les incubateurs du laboratoire : le nouveau taux optimal est de 7 % avec des EMT correspondants de +/- 1 %. Cette nouvelle méthode de mesure du pH de notre milieu s’intègrera parfaitement dans la stratégie métrologique actuellement en place au laboratoire. Des contrôles réguliers du pH, établis selon une fréquence définie par le biologiste responsable, permettront d’adapter au mieux la teneur en CO2 des incubateurs et participeront ainsi à l’optimisation des conditions de culture embryonnaire.
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Dates et versions

dumas-03352300 , version 1 (23-09-2021)

Identifiants

Citer

Quentin Renaut. Validation d’un plan de suivi métrologique du pH en culture embryonnaire. Médecine humaine et pathologie. 2021. ⟨dumas-03352300⟩
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