Determination of BRAF status in melanoma: comparison of immunohistochemical and molecular techniques on a series of 223 cases from the Caen University Hospital
Détermination du statut BRAF dans les mélanomes : comparaison des techniques immunohistochimiques et moléculaires sur une série de 223 cas issus du CHU de Caen
Résumé
Introduction: Screening for the BRAF mutation is needed for the indication of targeted therapies in melanoma. The reference technique relies on molecular biology (BM) but immunohistochemistry (IHC) is an interesting tool. Our goal was to compare these 2 techniques for the determination of BRAF status. Material and method: 223 melanoma samples benefiting from the BRAF double analysis (BM / IHC) from 01/07/2015 to 07/29/2020 at the Caen University Hospital were selected. BM was done by qPCR and IHC by mouse monoclonal antibody VE1, specific for BRAFV600E. Results: A first analysis showed 10 discordant cases including 5 cases with a positive result in BM and a negative result in IHC (BM +/IHC-) and 5 cases BM-/IHC +. The IHC then has a sensitivity (Se) of 92.6% and a specificity (Sp) of 98.5%. Then the 10 discordant results were analyzed secondarily. For the 5 discordant BM+/IHC- cases, 3 cases contain a V600K or V600R mutation and 1 case presents a false PCR amplification. Finally, only one case proved to be a false negative in IHC (presence of a double mutation). Among the 5 discordant BM-/IHC+ cases, the BRAFV600E mutation was found for 2 cases by sequencing. Finaly, only 3 cases were false positives (misinterpretation of the IHC). These new results showed a Se of 98.5% and a Sp of 98.1% for the IHC. Conclusion: This work supports that IHC is a sensitive and specific test to select first-line patients eligible for treatment with targeted anti-BRAF therapies, especially at a time of the development of short circuits in oncology.
Introduction : La recherche de la mutation BRAF est nécessaire pour l’indication des thérapies ciblées dans le mélanome. La technique de référence est la biologie moléculaire (BM) mais l’immunohistochimie (IHC) est une méthode intéressante. Notre objectif est de comparer ces 2 techniques pour la détermination du statut BRAF. Matériel et méthode : 223 échantillons de mélanomes bénéficiant de la double analyse BRAF (BM/IHC) du 07/01/2015 au 29/07/2020 au CHU de Caen ont été retenus. La BM était faite par qPCR et l’IHC par l’anticorps monoclonal de souris VE1, spécifique de BRAFV600E. Résultats : une première analyse a objectivé 10 cas discordants dont 5 cas avec un résultat positif en BM et un résultat négatif en IHC (BM+/IHC-) et 5 cas BM-/IHC+. L’IHC présente alors une sensibilité (Se) de 92,6 % et une spécificité (Sp) de 98,5 %. Puis les 10 résultats discordants ont été analysés secondairement. Pour les 5 cas discordants BM+/IHC-, 3 cas comportent une mutation V600K ou V600R et 1 cas présente une fausse amplification en PCR. Au total, un seul cas s’avère être un faux-négatif en IHC (présence d’une double mutation). Parmi les 5 cas discordants BM-/IHC+, la mutation BRAFV600E est retrouvée pour 2 cas par séquençage. Au final, seulement 3 cas sont des faux positifs (mauvaise interprétation de l’IHC). Selon ces nouveaux résultats, on retrouve une Se de 98,5 % et une Sp de 98,1 % pour l’IHC. Conclusion : ce travail soutient que l’IHC est un examen sensible et spécifique pour sélectionner en première intention les patients éligibles à un traitement par thérapies ciblées anti-BRAF, surtout à l’heure du développement des circuits courts en cancérologie.
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