Étude de la différenciation des SCAPs en progéniteurs endothéliaux et de leur bioimpression assistée par laser - DUMAS - Dépôt Universitaire de Mémoires Après Soutenance Accéder directement au contenu
Mémoires Année : 2015

Endothelial cell differentiation of SCAPs and laser assisted bioprinting

Étude de la différenciation des SCAPs en progéniteurs endothéliaux et de leur bioimpression assistée par laser

Résumé

Bone tissue engineering has shown limited success, mostly owing by lack of vascularization leading to poor graft integration. Some strategies can enhance vascularization in engineered bone construct. One of them result on the observation that endothelial cells (ECs) cocultured with osteoprogenitor cells can formed prevascular structures in vitro which can, after implantation, anastomose spontaneously to the ingrowing vasculature of host. The cross-talk between osteoblasts and ECs into the coculture creates a suitable environment to promote angiogenesis, to induce formation of a perivascular network and to stimulate osteoblastic differentiation. Here, we assumed that using cells derived from the same stem cell source can promote cell-cell interactions and osteoblastic differentiation. The aim of this study was to investigate if SCAPs can differentiate toward functional endothelial cells (SCAPs-E) and express endothelial markers. W! e studied the immunophenotype of SCAPs by flow cytometric analysis. The endothelial markers of SCAPs-E ( CD31 and vWf) were assayed by histochemical methods and real-time PCR. We demonstrated that SCAPs expressed a heterogeneous panel of makers associated with stemness. Moreover SCAPs-E expressed von Willebrand Factor (vWf) but not CD31. Also, our study focuses on the ability to seed SCAPs and endothelial cells by laser assisted bioprinting in order to control their organization on collagen. Cells viability was validated by a live/dead test.
L’ingénierie tissulaire osseuse reste une approche thérapeutique cliniquement limitée ; la principale raison est le manque de vascularisation du greffon après son intégration dans l’organisme. Plusieurs stratégies permettent de favoriser la vascularisation d’un produit d’ingénierie tissulaire osseuse. L’une d’elle est basée sur la constatation que des Cellules Endothéliales (CEs) associées à des progéniteurs ostéoblastiques sont capables de former des structures prévasculaires in vitro qui s’anastomosent spontanément avec le réseau vasculaire de l’hôte. Au sein de la coculture, la communication intercellulaire qui s’établit permet de créer un environnement favorable capable de promouvoir l’angiogénèse, d’induire la formation d’un réseau vasculaire et de stimuler la différenciation ostéoblastique. Dans cette étude, nous sommes partis de l’hypothèse selon laquelle les SCAPs pouvaient être orientées dans une voie de différenciation endothéliale (SCAPs-E) et exprimer des marqueurs endothéliaux. Le phénotype des SCAPs a pu être étudié par cytométrie en flux. La présence des principaux marqueurs des cellules endothéliales (CD31 et vWf) a pu être objectivée à l’aide d’immunofluorescence et par une méthode de polymérisation en chaîne (PCR). Nous avons pu démontrer que les SCAPs exprimaient une variété de marqueurs de surface propres aux cellules souches mésenchymateuses. De plus, nous avons pu mettre en évidence chez les SCAPs-E la présence du facteur de Von Willebrand mais l’absence de CD31. Nos travaux portaient également sur l’ensemencement des SCAPs et des cellules endothéliales sur une matrice collagénique par bioimpression assistée par laser. La viabilité des cellules a été validée par un test live/dead.
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Dates et versions

dumas-01121714 , version 1 (02-03-2015)

Identifiants

  • HAL Id : dumas-01121714 , version 1

Citer

Sarah Sandrin. Étude de la différenciation des SCAPs en progéniteurs endothéliaux et de leur bioimpression assistée par laser. Chirurgie. 2015. ⟨dumas-01121714⟩
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