Essai de stérilité des préparations produites en lot : neutralisation du pouvoir inhibiteur de la croissance bactérienne de certains cytotoxiques par des agents de complexation - DUMAS - Dépôt Universitaire de Mémoires Après Soutenance Access content directly
Master Thesis Year : 2020

Sterility testing of batch preparations: neutralization of some cytotoxics bacterial growth inhibition using complexation materials

Essai de stérilité des préparations produites en lot : neutralisation du pouvoir inhibiteur de la croissance bactérienne de certains cytotoxiques par des agents de complexation

Abstract

In the context of batch production of cytotoxic drugs in hospital pharmacies with the need of sterility testing, the objective was to validate the use of Rapid Microbiological Method (RMM), and to develop adequate neutralization method in case of inhibition of bacterial growth. The potential microbiological growth inhibitory effect of 3 anticancer drugs (5 fluorouracil, irinotecan and oxaliplatin) selected for batch production was assessed on BacT/ALERT® system. Among cytotoxic drugs, only 5FU exhibited inhibitory effect on microbiological growth using rapid microbiological method. To counteract this effect our purpose was to use neutralizing agents complexing the drug i.e. activated carbon or ion exchange resins. The microbiological bactericidal concentration of 5FU was very low (1.10-4 mg/mL) indicating the absolute need to neutralize the whole drug before sterility test. The complexation was validated by High Performance Liquid Chromatography control of the residual 5FU concentration in solution after the use of neutralizing agents. Only activated carbon was able to fully capture 5FU when previously diluted at 5 mg/ml. Conversely, the resins, in the condition of the study, were not able to fully capture 5FU whatever the dilution. The microbiological growth on BacT/ALERT® system after active carbon treatment was successfully confirmed with Staphylococcus aureus. Based on this validation results a method was then developed to routinely be able to perform sterility test of the batches produced and was confirmed on 5 microbiological species (i.e Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis, Candida albicans, Aspergillus brasiliensis). Our work gives a new insight for considering sterility testing by rapid microbiological method even for drugs exhibiting inhibitory effect on microbiological growth.
Dans les pharmacies hospitalières, la production de cytotoxiques en lot nécessite un test de stérilité. L’objectif de ce travail était de valider l’utilisation d’une méthode de microbiologique rapide, et de développer une méthode de neutralisation adéquate en cas d’inhibition de la croissance bactérienne. L’effet potentiel d’inhibition de la croissance microbiologique de trois anticancéreux sélectionnés pour la production en lot (5 fluorouracil irinotécan et oxaliplatine) a été évalué sur le système BacT/ALERT®. Parmi les médicaments cytotoxiques, seul le 5FU a montré un effet inhibiteur sur la croissance microbiologique. Pour contrecarrer cet effet, notre objectif était d’utiliser des agents neutralisants complexant la molécule, du charbon actif ou des résines échangeuses d’ions. La concentration microbiologique bactéricide du 5FU était très faible (1.10-4 mg/mL), ce qui indique la nécessité absolue de neutraliser la totalité du médicament avant le test de stérilité. La complexation a été validée par un dosage HPLC de la concentration résiduelle de 5FU en solution après l'utilisation d'agents neutralisants. Seul le charbon actif était capable de capturer complètement le 5FU lorsqu'il était préalablement dilué à 5mg/ml. Inversement, les résines, dans l'état de l'étude, n'ont pas été capables de capturer complètement le 5FU quelle que soit la dilution. La croissance microbiologique sur le système BacT/ALERT® après le traitement au charbon actif a été confirmée avec succès sur Staphylococcus aureus. Sur la base des résultats de cette validation, une méthode a ensuite été mise au point pour pouvoir effectuer en routine un test de stérilité des lots. Elle a été confirmée sur 5 espèces microbiologiques (Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus subtilis, Candida albicans, Aspergillus brasiliensis). Ces résultats offrent un nouvel éclairage pour envisager des tests de stérilité par microbiologique rapide, même pour les médicaments présentant un effet inhibiteur sur la croissance microbiologique.
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Dates and versions

dumas-03019731 , version 1 (23-11-2020)

Identifiers

  • HAL Id : dumas-03019731 , version 1

Cite

Maïté Sangnier. Essai de stérilité des préparations produites en lot : neutralisation du pouvoir inhibiteur de la croissance bactérienne de certains cytotoxiques par des agents de complexation. Sciences du Vivant [q-bio]. 2020. ⟨dumas-03019731⟩
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