Mise au point du dosage du 3-hydroxybenzo[a]pyrène urinaire et utilisation de ce métabolite comme biomarqueur d'exposition aux Hydrocarbures Aromatiques Polycycliques en population générale et professionnellement exposée
Abstract
Polycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAH) are lung, bladder and skin carcinogens. Some industries and all the general population are exposed. Only benzo(a)pyrene is classified as carcinogenic to humans. However, biological monitoring of exposure is performed by 1-hydroxypyrene analysis which is a metabolite of pyrene, a non-carcinogen PAH. Thus, we developed a analytical method for quantification urinary 3-hydroxybenzo(a)pyrene (3OHBaP). Analysis begins with a solid-phase extraction step followed by chromatographic separation using HPLC and fluorescence detection. Detection limit was equal to 0.02 ng/L and precision and accuracy were validated. The method was applied to non- occupationally and occupationally subjects. The median concentrations of 3OHBaP in urine of smokers was equal to 0.023 nmol/mol creatinine, i.e. twice than in non-smokers. Levels were respectively 7 and 17 times higher among industrial workers of silicon and carbon electrodes. Finding levels of 3OHBaP in different sampling time have established that the optimal time of urine collection was at the post shift at the end of the week, when exposure was for a full week. Strong variability of regression equation from the correlation between urinary levels of 3OHBaP and 1OHP was observed between the two sectors. Thus, because composition of PAH mixtures depends on source, use of 3OHBaP in biological monitoring of PAH is essential.
Les Hydrocarbures Aromatiques Polycycliques (HAP) sont responsables de cancers du poumon, de la vessie et de la peau. Certains salariés et la population générale y sont exposés. Seul le benzo(a)pyrène est classé cancérogène certain pour l'homme. Or, la surveillance biologique de leur exposition passe par le dosage du 1-hydroxypyrène (1OHP), métabolite issu du pyrène non cancérogène. C'est pourquoi nous avons développé une méthode de dosage du 3-hydroxybenzo(a)pyrène (3OHBaP) urinaire. L'analyse débute par une extraction en phase solide suivie d'une séparation chromatographique par HPLC et d'une détection par fluorescence. La limite de détection obtenue est de 0.02 ng/L et les paramètres de justesse et de fidélité ont été validés. La méthode a été appliquée à la population générale et à un groupe de salariés exposés. La médiane des concentrations de 3OHBaP dans les urines de sujets fumeurs étaient de 0.023 nmoles/mole de créatinine, soit deux fois plus que chez les non fumeurs. Les niveaux étaient respectivement 7 et 17 fois supérieurs chez les salariés du secteur industriel du silicium et des électrodes de carbone. Le dosage du 3OHBaP sur différentes mictions a permis d'établir que le moment optimal de prélèvement des urines était en fin de semaine fin de poste, lors d'une exposition pendant une semaine complète de travail. Une grande variabilité des droites de régression issues de la corrélation entre les niveaux urinaires de 3OHBaP et de 1OHP a été observée entre les deux secteurs. Ceci réaffirme le caractère source dépendant de la composition des mélanges d'HAP et souligne l'intérêt de l'utilisation du 3OHBaP comme biomarqueur d'exposition aux HAP cancérogènes.
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