La méthylation de l'ADN est une marque épigénétique qui participe à la régulation de l'expression des gènes, et il est avancé que le profil de méthylation des spermatozoïdes est important pour le développement embryonnaire précoce. La finalité du présent travail est d'évaluer l'impact de la cryoconservation du sperme sur la méthylation de l'ADN. Deux espèces dont l'organisation nucléaire des spermatozoïdes est très différente ont été choisies, le poisson zèbre (Danio rerio) et le cheval. En préalable, nous devions optimiser la méthode de cryoconservation du sperme de poisson zèbre. Face à la très faible production de gamètes chez cette espèce, nous avons recherché une amélioration de la production gamétique en jouant sur l'alimentation des géniteurs. Nous avons montré que le régime Tétramin® + Gemma Wean® améliorait la croissance et favorisait l'émission des gamètes. La qualité des gamètes avec ce régime est équivalente à celle obtenue avec un régime supplémenté en proies vivantes. La méthode de cryoconservation optimale dans nos conditions a consisté à utiliser un cryoprotecteur contenant 8 % de méthanol et 63 mM de saccharose, à une vitesse de -10 °C/min. Après cryoconservation, le niveau de méthylation de l'ADN des spermatozoïdes de poisson est affecté de façon complètement aléatoire, certains spermes montrant une hyperméthylation, d'autres une hypométhylation. Aucune donnée de méthylation n'a pu être obtenue sur le sperme d'étalon, du fait de difficultés méthodologiques dont nous avons cherché à comprendre l'origine.