Local early response to an MVA-mediated vaccination: effects of an MVA infection on skin fibroblasts and macrophages - DUMAS - Dépôt Universitaire de Mémoires Après Soutenance Accéder directement au contenu
Mémoires Année : 2015

Local early response to an MVA-mediated vaccination: effects of an MVA infection on skin fibroblasts and macrophages

Réponse locale précoce à une vaccination par MVA : effets d'une infection par MVA sur des fibroblastes et macrophages de la peau

Julie Jouffrey
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Résumé

MVA is an attenuated poxvirus frequently used in vaccine strategies. Previous results from the lab show unknown dermis cells expressing viral proteins. Those unidentified dermis cells have a morphology alike fibroblasts and/or macrophages. As MVA is routinely used as a recombinant vector in Non-human primates, this model is used here to identify dermis fibroblasts and monocyte-derived macrophages as infection targets of MVA, their cellular response to MVA and their immune role in the response to an MVA infection. Fibroblasts are cultured from skin biopsies and macrophages are derived from peripheral blood monocytes, then cell cultures are incubated with MVA-eGFP. Cells’ activity changes are monitored by flow cytometry and Multiplex® immunoassay on medium samples. The results seem to indicate an effective infection of fibroblasts, higher with culture time after infection, along with MVA-induced cell death. Macrophages do not appear infected but their activations markers undergo some changes in their expression. Both cell types, either infected or not, appear to show different cytokine secretions in presence of MVA.
Le MVA est un virus atténué de la famille des poxvirus fréquemment utilisé dans des stratégies de vaccination. Des résultats préliminaires de l’équipe montrent des cellules non identifiées du derme exprimant des protéines virales. Ces cellules non identifiées possèdent une morphologie proche de celle des fibroblastes et/ou macrophages. Le MVA étant utilisé en routine comme un vecteur recombinant chez les primates non-humains, ce modèle est utilisé ici pour étudier les fibroblastes du derme et les monocytes différenciés en macrophages comme cibles potentielles du MVA, leur réponse cellulaire au MVA et leur rôle immunitaire dans l’infection au MVA. Les fibroblastes sont mis en culture à partir de biopsies de peau et les macrophages sont obtenus par différenciation de monocytes du sang périphérique. Les cellules sont ensuite incubées en présence de MVA-eGFP. L’activité des cellules est mesurée par cytométrie en flux et immunodosage en technologie Multiplex® sur des échantillons de surnageant de culture. Les résultats semblent montrer une infection des fibroblastes ainsi qu’une mort cellulaire induite par le virus. Les macrophages n’apparaissent pas infectés mais leurs marqueurs d’activation subissent des changements d’expression/ Les deux types cellulaires, infecté ou non, montrent des différences de sécrétion de cytokines en présence de MVA.
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Dates et versions

dumas-01176350 , version 1 (15-07-2015)

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  • HAL Id : dumas-01176350 , version 1

Citer

Julie Jouffrey. Local early response to an MVA-mediated vaccination: effects of an MVA infection on skin fibroblasts and macrophages. Life Sciences [q-bio]. 2015. ⟨dumas-01176350⟩
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