Étude et développement de nouvelles méthodes de génétique inverse appliquées aux Arbovirus

Résumé : Les systèmes de génétique inverses, permettant de manipuler les génomes viraux, sont indispensables pour approfondir nos connaissances en virologie. De nombreux systèmes existent, dont le plus communément utilisé, le clone infectieux (CI), présente des avantages et des inconvénients. La méthode ISA (« Infectious Subgenomic Amplicons ») est une nouvelle méthode de génétique inverse particulièrement versatile. Les virus sont produits après transfection de 3 fragments d’ADN distincts, complémentaires du génome viral et amplifiés par PCR. Dans ce mémoire, nous avons cherché à comparer les populations virales obtenues par la méthode ISA à celles issues de la transfection d’un CI. Phénotypiquement, les deux populations ne présentaient pas de différences. Cependant, les virus obtenus par la méthode ISA présentaient une plus grande hétérogénéité au sein du génotype. Nous avons donc tenté de développer une méthode conservant les avantages de la méthode ISA et conduisant à une population semblable à celle issue de la transfection d’un CI, une population clonale. Pour cela, des polymérases de plus grande fidélité ont été utilisées et une nouvelle procédure, appelée « clonal-ISA » a été développée et mise en application pour la première fois. Dans les deux cas, les populations obtenues n’étaient pas différentes phénotypiquement et se rapprochaient génotypiquement des virus produits par la transfection d’un clone infectieux et plus particulièrement pour la méthode « clonal-ISA ». Par conséquent, les méthodes ISA et « clonal-ISA », aux caractéristiques bien différentes, représentent déjà des alternatives intéressantes à l’utilisation d’un clone infectieux.
Type de document :
Mémoires
Sciences pharmaceutiques. 2017
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Contributeur : Pharmacie Amu <>
Soumis le : mardi 13 juin 2017 - 10:41:12
Dernière modification le : jeudi 17 mai 2018 - 01:24:16
Document(s) archivé(s) le : mardi 12 décembre 2017 - 10:23:33

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Jean-Sélim Driouich. Étude et développement de nouvelles méthodes de génétique inverse appliquées aux Arbovirus . Sciences pharmaceutiques. 2017. 〈dumas-01537911〉

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