Définition par cytométrie en flux des valeurs de référence pour 16 sous-populations de la moelle osseuse en fonction de l'âge et mise au point d'un critère cytométrique d'appréciation de la dilution médullaire par le sang périphérique - DUMAS - Dépôt Universitaire de Mémoires Après Soutenance Accéder directement au contenu
Mémoires Année : 2015

Definition of reference values for 16 bone marrow subsets by flow cytometry according to age and proposal of a cytometric criterion for medullar dilution evaluation

Définition par cytométrie en flux des valeurs de référence pour 16 sous-populations de la moelle osseuse en fonction de l'âge et mise au point d'un critère cytométrique d'appréciation de la dilution médullaire par le sang périphérique

Julie Pont
  • Fonction : Auteur
  • PersonId : 1025611

Résumé

Bone marrow immunophenotyping by flow cytometry is an essential tool to screen, classify and monitor hematological malignancies. Our aim in the present work is to determine reference values for myeloid and lymphoid bone marrow subpopulations. A major issue for bone marrow cell subsets quantification is contamination by peripheral blood-derived cells which modify cell counts. Thus, in a first step, we validated a criterion for assessing cytometric bone marrow purity. It’s the ratio of immature granulocytes (IGRA) on neutrophils. In a cohort of 106 patients, we have shown that this parameter is highly correlated to the standard Holdrinet method. This first validated cytometric test is unique, easy to calculate, applicable for children and adults, for normal or pathological samples. Secondly we used this cytometric criterion to select 97 cytomorphologically normal, undiluted bone marrow samples, in an oligocentric study with Saint-Etienne and Lyon hospitals. We determined the reference values of 16 subpopulations in 5 age groups, from infants to over 70 years old adults. They are the only values available by flow cytometry for as many populations and for as many age classes. Finally, our study is the last step before testing the capacity of this 8-color tube to screen hematological disorders in bone marrow samples.
L'immunophénotypage de la moelle osseuse par cytométrie en flux est un outil indispensable au screening, classement et suivi des hémopathies malignes. Notre objectif dans ce travail est de déterminer des valeurs de référence pour les sous populations lymphoïdes et myéloïdes de la moelle. Un problème important est la fréquente hémodilution des moelles osseuses qui modifie les proportions des populations. Dans un premier temps, nous avons donc validé un critère cytométrique d'appréciation de la pureté médullaire : le rapport des granuleux immatures (GRIM) sur les PNN. Sur une cohorte de 106 patients, nous avons montré que ce paramètre était fortement corrélé à la méthode d'Holdrinet. Il s'agit ainsi du premier critère cytométrique validé. Il est unique, facile à calculer, utilisable chez l'enfant comme chez l'adulte, que la moelle soit normale ou pathologique. Nous avons dans un second temps utilisé ce critère cytométrique pour sélectionner 97 moelles osseuses cytologiquement normales, non diluées, dans une étude oligocentrique avec les CHU de Saint-Etienne et de Lyon et nous avons déterminé les valeurs de référence de 16 sous-populations pour 5 classes d'âge, du bébé à l'adulte de plus de 70 ans. A ce jour, il s'agit des seules valeurs disponibles en cytométrie pour autant de populations et pour tous les âges de la vie. Finalement, notre étude est l’étape ultime avant l’évaluation des capacités de screening des hémopathies de ce tube en 8 couleurs dans la moelle osseuse.
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Julie Pont. Définition par cytométrie en flux des valeurs de référence pour 16 sous-populations de la moelle osseuse en fonction de l'âge et mise au point d'un critère cytométrique d'appréciation de la dilution médullaire par le sang périphérique. Sciences pharmaceutiques. 2015. ⟨dumas-01674613⟩
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