Étude de stabilité des marqueurs du dépistage néonatal sur tâche de sang séché sur papier buvard - DUMAS - Dépôt Universitaire de Mémoires Après Soutenance Accéder directement au contenu
Mémoires Année : 2018

Stability of newborn screening markers in dried-blood spot

Étude de stabilité des marqueurs du dépistage néonatal sur tâche de sang séché sur papier buvard

Résumé

In France, 5 diseases are subject to newborn screening using biological tests on dried blood spots (DBS): phenylketonuria, congenital hypothyroidism, congenital adrenal hyperplasia, cystic fibrosis and sickle cell disease. Since June 2011, the French National Authority for Health (HAS) recommends the expansion of the newborn screening program to Medium-chain acyl-CoA dehydrogenase deficiency (MCADD). Since 2013, AFDPHE recommends to store Residual DBS (RBS) at +4°C and at least one year after the newborn screening has been completed. RBS constitute an important resource for DNA testing, post mortem investigations, validation of new analytical methods and for epidemiological studies. IMAGENE®, an innovative biotechnology company has developed a new and unique storage technology which preserves biological samples at room temperature (RT) in a stainless-steel microcapsule sealed hermetically. Stabiospot study is designed with 3 major goals: To assess neonatal screening biomarkers patterns of sensibility to heat and humidity; Validate AFDPHE recommendations for DBS storage; Evaluate IMAGENE® capsule performances for DBS conservation. The study includes 30 biological markers (carnitine (C0), acylcarnitines, amino acids, SCID (T-cell receptor excision circle (TREC), hemoglobin S, immunoreactive trypsinogen (IRT), thyroxine (T4), thyroid-stimulating hormone (TSH), 17-α--hydroxyprogesterone (17-OHP). We performed two accelerated degradation studies and a long-term conservation study. The 30 biomarkers present different patterns of sensitivity to heat and humidity. Methionine, free carnitine and HbS are the most labile compounds. Data indicated that DBS sample should be transported and stored in low humidity and low temperature conditions. Study 3 results validate AFDPHE recommendations for RBS storage. If conservation period does not exceed one year, a storage at +4°C ensure a good biomarkers stability, except for HbS. Finally, IMAGENE®’s minicapsule present very good performances for DBS conservation, equivalent to those of freezing (-20°C). Thanks to a low energy consuming storage, a reduced storage volume and a good trackability of samples, IMAGENE®’s capsule offers an innovative solution for RBS conservation, particularly for long-term sample storage and constitution of biobanks.
En France, cinq maladies sont dépistées systématiquement à la naissance : la phénylcétonurie, l’hypothyroïdie congénitale, l’hyperplasie congénitale des surrénales, la mucoviscidose et la drépanocytose (population à risque). Depuis juin 2011, la haute autorité de santé recommande l’extension du dépistage néonatal au déficit en déshydrogénase des acides gras à chaîne moyenne (MCADD). L’AFDPHE recommande la conservation des tâches de sang résiduelles à + 4°C pour une durée minimale de 1 an. Elles constituent une source d’échantillons biologiques permettant de reconfirmer les résultats initiaux du dépistage néonatal, des investigations post-mortem et des études épidémiologiques. La société IMAGENE® a breveté un procédé industriel innovant d’encapsulation de matériel biologique pour une conservation à température ambiante. Ce procédé est basé sur le confinement des échantillons, préalablement desséchés, sous une atmosphère anoxique et anhydre dans des minicapsules métalliques. L’étude Stabiospot a été conçue avec 3 grands objectifs : Évaluer les profils de sensibilité et de stabilité au sein des buvards des marqueurs biologiques du dépistage néonatal vis-à-vis de la chaleur et de l’humidité ; Valider les recommandations AFDPHE pour la conservation des buvards résiduels ; Déterminer les performances de la technologie IMAGENE® pour la conservation des buvards. Un total de 30 marqueurs biologiques [Acides aminés, carnitine libre, acylcarnitines, T4, TSH, 17-OH-progestérone (17OHP), trypsine immunoréactive (TIR), hémoglobine S (HbS) et TREC (SCID)] ont été testés. Nous avons mené 2 études de dégradation accélérée ainsi qu’une troisième étude de conservation à long terme. Une importante hétérogénéité des profils de sensibilité des différents biomarqueurs vis-à-vis de la chaleur et de l’humidité a pu être mise en évidence au terme des 2 études de dégradation accélérée. La méthionine, la carnitine libre ainsi que l’HbS constituent les biomarqueurs les plus labiles. Un faible taux d’humidité et une température basse sont donc indispensables à la bonne conservation des buvards. Les résultats de l’étude 3 nous permettent de valider les recommandations AFDPHE concernant le stockage des buvards résiduels du DNN. Si la durée de conservation n’excède pas 1 an, un stockage des échantillons à +4°C permet d’assurer la bonne stabilité de l’ensemble des biomarqueurs excepté l’hémoglobine S. Enfin, la technologie d’encapsulation IMAGENE® offre de très bonnes performances, équivalentes à celles de la congélation à -20°C, pour la conservation des buvards. Le faible coût énergétique du stockage, son volume réduit ainsi que la traçabilité des échantillons possible grâce à la capsule en font une alternative innovante à la congélation pour la conservation des tâches de sang résiduelles, en particulier pour la constitution de banques d’échantillons biologiques.
Fichier principal
Vignette du fichier
Pharmacie_2018_Amintas.pdf (6.7 Mo) Télécharger le fichier
Loading...

Dates et versions

dumas-01876510 , version 1 (18-09-2018)

Identifiants

  • HAL Id : dumas-01876510 , version 1

Citer

Samuel Amintas. Étude de stabilité des marqueurs du dépistage néonatal sur tâche de sang séché sur papier buvard. Sciences pharmaceutiques. 2018. ⟨dumas-01876510⟩
159 Consultations
633 Téléchargements

Partager

Gmail Facebook X LinkedIn More