Effets fonctionnels des mutations de KDM6A dans la leucémie à tricholeucocytes - DUMAS - Dépôt Universitaire de Mémoires Après Soutenance Accéder directement au contenu
Mémoires Année : 2020

Functional effects of KDM6A mutations in hairy cell leukemia

Effets fonctionnels des mutations de KDM6A dans la leucémie à tricholeucocytes

Résumé

Hairy cell leukemia (HCL) and its variant form (HCL-v) are B-cell lymphoproliferative disorders characterized by BRAF and MAP2K1 mutations responsible of abnormal activation of MAPkinases signaling pathway. Additional mutations to these driver anomalies have been identified. We are interested in the KDM6A gene which codes for a lysine demethylase exerting a role of tumor suppressor. Its loss of expression would sensitize tumor cells to inhibitors of EZH2, a methyltransferase. In order to study the functional impact of the inactivation of KDM6A in HCL, we transfected a CRISPR- Cas9 system targeting exon 4 of the gene in the JVM-3 cell line. The loss of expression of KDM6A in this line promotes activation of the MAPK pathway without modifying the proliferative capacities of the cells, nor their sensitivity to BRAF inhibitors. The edited cells show better resistance to nutrient deprivation, consistent with an increase in the expression of survivin. No increased sensitivity of the modified cells to epigenetic therapies including EZH2 inhibitors has been observed. The inactivation of KDM6A thus appears to contribute to the activation of the oncogenic pathway of MAPK in HCL but does little to modify the capacities of the hairy-cells and their response to chemotherapies and targeted therapies.
La leucémie à tricholeucocytes (HCL) et sa forme variante (HCL-v) sont des syndromes lymphoprolifératifs B caractérisés par des mutations de BRAF et de MAP2K1 responsables d’une activation anormale de la voie des MAP-kinases. Des mutations additionnelles à ces anomalies drivers ont été identifiées. Nous nous sommes intéressés au gène KDM6A qui code pour une lysine déméthylase exerçant un rôle de suppresseur de tumeur. Sa perte d’expression sensibiliserait les cellules tumorales aux inhibiteurs d’EZH2, une méthyltransférase. Afin d’étudier l’impact fonctionnel de l’inactivation de KDM6A dans la HCL, nous avons transfecté un système CRISPR-Cas9 ciblant l’exon 4 du gène dans la lignée cellulaire JVM-3. La perte d’expression de KDM6A dans cette lignée favorise l’activation de la voie des MAPK sans modifier les capacités prolifératives des cellules, ni leur sensibilité aux inhibiteurs de BRAF. Les cellules éditées présentent une meilleure résistance à la privation en nutriments concordante avec une augmentation de l’expression de la survivine. Il n’a pas été observé de sensibilité accrue des cellules modifiées aux thérapies ciblant l’épigénétique incluant les inhibiteurs d’EZH2. L’inactivation de KDM6A paraît ainsi concourir à l’activation de la voie oncogénique des MAPK dans la HCL mais modifie peu les capacités des tricholeucocytes et leur réponse aux chimiothérapies et thérapies ciblées.
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Dates et versions

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Identifiants

  • HAL Id : dumas-03077527 , version 1

Citer

Margaux Wiber. Effets fonctionnels des mutations de KDM6A dans la leucémie à tricholeucocytes. Sciences pharmaceutiques. 2020. ⟨dumas-03077527⟩
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