La leishmaniose canine est une maladie vectorisée fortement prévalente dans le sud de la France et dans les pays du pourtour méditerranéen. Cependant des données de séroprévalence récentes sont manquantes en France métropolitaine. Une étude de séroprévalence a été initiée chez des chiens de chasse (n=169) dans une zone enzootique, les Cévennes, en 2022. Cette première campagne de prélèvements a estimé une séroprévalence chez le chien de l’ordre de 14% en utilisant le kit ELISA Bordier®. Une nouvelle enquête a été réalisée durant l’hiver 2023. L’objectif de ce travail était : (i) d’étudier la dynamique de l’infection en suivant l’évolution du statut sérologique des chiens prélevés lors des deux enquêtes, (ii) d’évaluer l’apport de la technique de western-blot (WB), en particulier pour distinguer les chiens vaccinés des non vaccinés. Pour cela, la détection d’anticorps a été réalisée par méthode ELISA (Bordier®) et par western-blot (LDBio®). 192 chiens ont été inclus dans l’étude en 2023 (dont 87 suivis depuis 2022). La séroprévalence a été estimée à 21,8% par WB et à 10,9% par méthode ELISA, montrant des valeurs équivalentes à celles obtenues lors de la campagne précédente. Une incidence de 4,6% a été calculée dans la population des chiens suivis. Ce travail met en évidence la sensibilité insuffisante de la méthode ELISA par rapport à celle obtenue par Western Blot avec 45,41% contre 90,93% respectivement. Le Western Blot semble de plus capable de détecter des infections précoces, avant l’apparition de signes cliniques. Aucune interférence vaccinale n’a été mise en évidence dans notre étude, notamment avec le vaccin Letifend®.