L'insémination artificielle, avec du sperme congelé, est couramment utilisée en reproduction équine. Cependant, environ 20% des éjaculats ne peuvent pas être congelés. De nombreuses études visent donc à améliorer les techniques de congélation. Un facteur ajustable est la période d’équilibration, correspondant au temps pendant lequel le sperme est maintenu à 4°C avant la congélation. Pour le sperme d’étalon, une équilibration d'environ 2 heures à 4 °C est couramment utilisée. Mais, chez d’autres espèces, certaines recherches ont montré que prolonger cette période permettait d’améliorer la qualité du sperme. Ainsi, notre étude vise à évaluer l'impact de différentes durées d’équilibration (2, 4 ou 6 heures) sur la qualité du sperme après décongélation. Pour cela, nous avons collecté 23 éjaculats provenant de cinq étalons. Après centrifugation les spermatozoïdes ont été dilués dans le milieu INRA FREEZE® à une concentration de 100 millions de spermatozoïdes par mL. Ensuite après avoir été maintenu pendant 2, 4 ou 6h à 4°C le sperme a été congelé dans des paillettes de 0,5 ml. Les paramètres de mobilité ont été évalués à l'aide de l'analyse assistée par ordinateur. Ainsi une durée d’équilibration de 6h conduit à des pourcentages plus élevés de spermatozoïdes mobiles après décongélation (31,8 % ; P<0,05) par rapport à une période de 4 heures (27,7%) et de 2 heures (23,9 %), et la mobilité progressive est moins bonne pour une période d’équilibration de 2h (12% ; P<0,05) comparé aux durées d’équilibration de 6h (16%) et de 4h (14,6%).Pour conclure, nous suggérons avec nos premiers résultats que le sperme soit maintenu à 4 °C pendant 4 à 6 heures avant la congélation.